Diferencia clave: AFLP vs RFLP

Los estudios de ADN tienen una inmensa importancia en la comprensión y determinación de las relaciones filogenéticas, el diagnóstico de enfermedades genéticas y el mapeo de los genomas de los organismos. Varias técnicas asociadas con el análisis de ADN también se utilizan para la identificación de un gen particular o una secuencia de ADN en un grupo de ADN desconocido. Son conocidos como marcadores moleculares. El polimorfismo de longitud de fragmento amplificado (AFLP) y el polimorfismo de longitud de fragmento de restricción (RFLP) son dos de estos marcadores moleculares (métodos) desarrollados en biología molecular para detectar la variación genética entre organismos. Ambos métodos son igualmente importantes y tienen ventajas y desventajas. La diferencia clave entre AFLP y RFLP es que AFLP implica la amplificación selectiva por PCR del ADN digerido, mientras que RFLP no implica la amplificación selectiva por PCR de los fragmentos de ADN.

CONTENIDO 1. Descripción general y diferencia clave 2. Qué es AFLP 3. Qué es RFLP 4. Comparación lado a lado - AFLP vs RFLP 5. Resumen

¿Qué es AFLP?

El AFLP (polimorfismo de longitud de fragmento amplificado) es una herramienta importante en biología molecular y se usa ampliamente en el análisis de variación genética. AFLP se basa en la amplificación por PCR específica del ADN genómico fragmentado y la detección del polimorfismo mediante autorradiografías mediante electroforesis en gel. AFLP contribuye ampliamente a identificar diferencias genéticas en cepas o especies estrechamente relacionadas de varios reinos, incluyendo plantas, animales, bacterias y hongos. AFLP puede llevarse a cabo con pequeñas cantidades de muestras de ADN desconocidas. No requiere conocimiento previo de secuencia y diseño de sondas.

Pasos de AFLP


  1. Aislamiento de ADN Digestión del ADN con endonucleasas de restricción Ligadura de los fragmentos de ADN restringidos con adaptadores Amplificación selectiva de los fragmentos con sitios de restricción específicos Separación de los productos de PCR por electroforesis en gel Visualización de la matriz de gel por autorradiografía

AFLP es un método más sensible y reproducible que se puede utilizar en la elaboración de perfiles de ADN de varios taxones, incluidos hongos, bacterias, plantas y animales sin conocimiento previo de secuencias de ADN. Ayuda a identificar pequeñas diferencias entre los individuos en las poblaciones debido a su naturaleza altamente sensible. AFLP también es importante en el mapeo del genoma, estudios forenses, pruebas parentales, genotipos, etc.

¿Qué es RFLP?

Los polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (RFLP) son una técnica que se utiliza para detectar las variaciones genéticas en las secuencias de ADN homólogas. Es el primer método desarrollado para la creación de perfiles de ADN. Los organismos tienen huellas digitales de ADN o perfiles de ADN únicos. RFLP sirve como una herramienta importante para analizar la variación entre los perfiles de ADN de organismos intraespecíficos o estrechamente relacionados, ya que las secuencias homólogas tienen diferentes sitios (ubicaciones) de restricción que son únicos para un organismo en particular. Cuando el ADN homólogo se digiere con endonucleasas de restricción específicas, dará como resultado diferentes perfiles de ADN que son únicos para cada individuo. Por lo tanto, el principal de este método es la detección de la variación genética entre organismos mediante la restricción de ADN homólogo con enzimas de restricción específicas y el análisis del polimorfismo de la longitud del fragmento mediante electroforesis en gel y transferencia. Los patrones de transferencia son únicos para cada organismo y caracterizan los genotipos específicos.

Pasos de RFLP

  1. Aislamiento de una cantidad suficiente de ADN de las muestras Fragmentación de las muestras de ADN con endonucleasas de restricción específicas en una secuencia corta Separación de los fragmentos resultantes con diferentes longitudes por electroforesis en gel de agarosa. Transferencia del perfil de gel a una membrana mediante transferencia Southern. Hibridación de la membrana con sondas marcadas y análisis del polimorfismo de longitud de fragmento en cada perfil.

RFLP es una técnica muy importante para detectar la herencia de la enfermedad y encontrar el riesgo de que ocurra la enfermedad entre los miembros de la familia. RFLP también se usa con frecuencia en el mapeo del genoma, identificando criminales en análisis forenses, pruebas de paternidad, etc. RFLP también tiene varias limitaciones. RFLP requiere el conocimiento previo de datos de secuencia para diseñar sondas para hibridación. También requiere el aislamiento de una cantidad suficiente de ADN de la muestra para analizar, lo cual es difícil en estudios forenses.

¿Cuál es la diferencia entre AFLP y RFLP?

Resumen - AFLP vs RFLP

AFLP y RFLP son dos técnicas utilizadas como marcadores genéticos para la evaluación de la diversidad y la evaluación de las relaciones genéticas en biología molecular. AFLP sirve como un método eficiente y sensible para la detección de polimorfismos genéticos entre organismos que RFLP. Sin embargo, aunque ambos métodos tienen diferentes eficiencias en la detección de variaciones genéticas, todavía se utilizan para la toma de huellas digitales de ADN y el diagnóstico de enfermedades.

Referencia: `1. García, Antonio AF, Luciana L. Benchimol, Antônia MM Barbosa, Isaias O. Geraldi, Souza Jr. Cláudio L. y Anete P. De Souza. "Comparación de marcadores RAPD, RFLP, AFLP y SSR para estudios de diversidad en líneas endogámicas de maíz tropical". Genética y Biología Molecular. Sociedade Brasileira de Genética, 2004. Web. 19 de marzo de 2017 2. "Polimorfismo de longitud de fragmento de restricción (RFLP)". Centro Nacional de Información Biotecnológica. Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU., Web nd. 19 de marzo de 2017 3. Masiga DK y Turner CM (2004). "Análisis de polimorfismo de longitud de fragmento amplificado (restricción) (AFLP)". Métodos Mol Biol: 270: 173-86. NCBI. Web. 19 de marzo de 2017

Imagen cortesía: 1. "ALFP" Por Barbarroja en Wikipedia en holandés - Transferido de nl.wikipedia a Commons. (Dominio público) a través de Commons Wikimedia 2. "Mapeo RFLP" Por Retama - Trabajo propio (GFDL) a través de Commons Wikimedia